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类风湿关节炎滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库的构建
类风湿关节炎(RA)是一种自身抗原驱动,T细胞介导的全身性自身免疫病。关节滑膜做为RA主要炎症反应部位,可能是自身抗原存在并激活免疫反应的部位。本研究通过构建滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库,为鉴定及筛选RA相关自身抗原提供试验基础。首先,采用T7Select10-3 OrientExpress Random Primer cDNA Cloning System构建RA滑膜组织T7噬菌体展示cDNA文库。然后,分离早期RA患者血清IgG,经3-4轮生物淘选扩增展示早期RA患者滑膜组织中特异性抗原肽的噬菌体,并通过测序、原核表达、ELISA及Western blot等方法鉴定该抗原肽在RA中的意义。
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