系统性红斑狼疮肿瘤坏死因子受体Ⅱ196位点基因多态性及重组反转录病毒载体的构建

Tumor necrosis factor receptor Ⅱ position196 polymorphism in systemic lupus erythematosus and establishment of recombinant retroviral vector

魏长空　叶任高　李幼姬　杨念生　董秀清　余学清　

摘　要：目的调查南方地区中国人肿瘤坏死因子受体Ⅱ(TNFRⅡ)196位基因多态性与系统性红斑狼疮(SLE)的关系并构建野生和突变的反转录病毒载体以研究其功能差异.方法利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测了106例SLE和119名健康人TNFRⅡ196位的基因型.将扩增TNFRⅡ196M cDNA克隆到PMD18-T载体上,定点突变为TNFRⅡ196R,然后亚克隆到反转录病毒载体PLXSN上(PLXSN-TNFRⅡ196M和PLXSN-TNFRⅡ196R)并分别转染大鼠系膜细胞,以四甲基偶氮唑(MTT)法观察对系膜细胞增生的影响.结果①SLE组TNFRⅡ196R等位基因型明显高于正常组(35.2%vs14.3%,P＜0.05);②成功构建野生型和突变型重组反转录病毒载体;③rhTNFF-α刺激后196R型转染系膜细胞的增生明显高于196M型(P＜0.05).结论 TNFRⅡ196R与中国南方地区SLE相关,其可以高效传导TNF-α的信号,可能参与SLE的发病.
关键词：红斑狼疮,系统性;受体,肿瘤坏死因子;逆转录病毒载体;转染

基金项目：中山医科大学"211"工程资助项目(98151);教育部博士点资助项目(082005)
作者单位：魏长空（510080,广州,中山大学附属一院肾内科,卫生部肾脏病临床研究重点实验室）　
　　　　　叶任高（510080,广州,中山大学附属一院肾内科,卫生部肾脏病临床研究重点实验室）　
　　　　　李幼姬（510080,广州,中山大学附属一院肾内科,卫生部肾脏病临床研究重点实验室）　
　　　　　杨念生（510080,广州,中山大学附属一院肾内科,卫生部肾脏病临床研究重点实验室）　
　　　　　董秀清（510080,广州,中山大学附属一院肾内科,卫生部肾脏病临床研究重点实验室）　
　　　　　余学清（510080,广州,中山大学附属一院肾内科,卫生部肾脏病临床研究重点实验室）　

参考文献：

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收稿日期：2004年3月22日

出版日期：2004年6月15日

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