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系统性红斑狼疮、干燥综合征、皮肌炎、多发性肌炎等自身免疫性疾病及结节性多动脉炎、韦氏肉芽肿等血管炎病的临床表现复杂多样,极易被误诊、漏诊,因此被医学界列为疑难病症。
在医生们遇到困难之时,免疫学家为他们提供了诊断这类疾病的手段——抗核抗体(ANA)检测。从1957年以啮齿动物组织冰冻切片为抗原底物,应用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA以来,许多学者对ANA检测方法进行了大量研究。40余年来,人们对ANA的认识不断加深,ANA特异性靶抗原逐一被发现并得到纯化。ANA谱的现代定义是指细胞内所有抗原成分的自身抗体的总称。目前除了抗核抗体以外,还有抗ENA抗体、抗中性粒细胞胞浆抗体。
多种免疫性疾病ANA阳性,系统性红斑狼疮、干燥综合征等弥漫性结缔组织疾病的阳性率更高。以往临床常规检测ANA一般用免疫荧光法(IIF)作为筛选试验,用IIF检测ANA敏感性高、特异性强,但采用的底物不同则结果有差异。常用两种底物——人喉癌上皮细胞(Hep-2)与鼠肝细胞,目前国际上多用以Hep-2为底物的IIF检测ANA。该方法被称为“金标准”,但操作较复杂,读片人要有一定经验。因此,有些单位采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测ANA。有人认为ELISA法对ANA高滴度阳性标本的敏感性高,与IIF的符合率高,对低滴度阳性标本的敏感性低。低滴度阳性的ANA可能出现于正常老年人及非结缔组织疾病患者。
ENA是可提取性核抗原的英文缩写,因此抗ENA抗体的全称是抗可提取性核抗原抗体。目前检测抗ENA抗体常用的方法有3种:免疫双扩散法、免疫印迹法和免疫电泳法。其中免疫印迹法敏感性最高,免疫双扩散法特异性最强。用免疫印迹法检测抗ENA抗体,一次可检出6~8种自身抗体,它们是抗Sm、抗RNP、抗SSA、抗SSB、抗Scl-70和抗Jo-1抗体等。抗Sm抗体是系统性红斑狼疮的标记性抗体,对于早期、不典型或经治疗缓解后患者的回顾性诊断有很大帮助。抗SSA、抗SSB抗体用于干燥综合征的诊断,在原发性干燥综合征患者中,抗SSA、抗SSB抗体阳性率分别为60%和40%。抗SSA、抗SSB抗体阳性还可造成新生儿狼疮及先天性房室传导阻滞。抗Scl-70抗体对硬皮病的诊断高度特异,阳性率为40%。抗Jo-1抗体被认为是多发性肌炎和皮肌炎的标记性抗体,在多发性肌炎的阳性率为20%,在皮肌炎的阳性率为10%。该抗体阳性的病人常有肌炎合并肺间质病变、对称性关节炎、发热等,称为抗Jo-1抗体综合征。
抗中性粒细胞胞浆抗体也是一种自身抗体,英文简称ANCA,1982年被发现。用间接免疫荧光法检测ANCA敏感性高、特异性强,分为两型——胞浆型(cANCA)与核周型(pANCA),其中胞浆型多见于微血管炎、韦氏肉芽肿,核周型则多见于系统性红斑狼疮、自身免疫性肝炎、溃疡性结肠炎及抗肾小球基底膜疾病。临床常规检测ANCA一般用免疫荧光法作为筛选试验,选用酶联免疫吸附法作为特异性ANCA确证试验。随着对ANCA的深入研究,ANCA特异性靶抗原逐一被发现并得到纯化。它们是蛋白酶3(PR3)、髓过氧化物酶(MPO)及乳铁蛋白(LF)等。这些靶抗原的水平高低与自身免疫性疾病的病情活动相关,因此可用于判断疗效、估计预后。
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